Uit de wereld van de bio-ingenieurs, denk ik.

1. Bereid 130 ul vers 3X ​​reducerende SDS laadbuffer door het toevoegen van 4 ul van 1.25m DTT.
2. Voeg 12,5 ul van de voorbereide 3x reducerende SDS laadbuffer aan elk monster.
3. Sluit de buizen met nieuwe caps en tik de buizen om te mengen.
4. Incubeer de buizen in een thermocycler bij 94 ° C gedurende 5 minuten en daarna afkoelen tot 4 ° C.
5. Belasting 30 pi van elk monster en 10 ul van het eiwit marker op een 10-20% Tris-Glycine gel. Sla de rest van de steekproef voor deel 3.1. Belasting 10μl van ColorPlus Prestained Protein Marker.
6. Electrophorese de gel op 130 volt bij kamertemperatuur totdat de kleurstof voorkant is de buurt van de onderkant van de gel.
7. Wanneer de gel is voltooid, verwijdert u de gel uit de cast en plaats deze in een klein plastic doosje met genoeg Coomasie blauwe vlek om de gel te dekken.
8. Vlekken op de gel gedurende 1 uur onder zacht schudden.
9. Was de gel drie keer voor 30 minuten in 50 ml van destain oplossing.
10. Noteer de beelden met behulp van een wit licht transilluminator of scanner. Als alternatief kan de gel worden gedroogd tussen de bladen van cellofaan in een frame.

Uit: Identificatie en karakterisering van proteïne glycosylering met behulp van specifieke endo-en exoglycosidases.

Leuven, Tervuursestraat, 1 april 2015, Foto Hendrik Elie Vanden Abeele